Аннтотация

Хотя было продемонстрировано, что путь цАМФ влияет как на адаптивные, так и на врожденные функции клеток, роль этого пути в регуляции аутоиммунного воспаления центральной нервной системы (ЦНС), вызванного Т-клетками, такого как экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (ЭАЭ), остается. неясно. Также неясно, как путь цАМФ влияет на функцию CD4 Т-клеток in vivo.на месте воспаления. Мы обнаружили, что активатор аденилатциклазы форсколин помимо ингибирования функций аутоиммунных CD4 T-клеток также активирует микроРНК (miR) -124 в ЦНС во время EAE, что связано с фенотипом M2 микроглии / макрофагов. Наше исследование также установило, что в дополнение к прямому влиянию пути цАМФ на CD4 Т-клетки, стимуляция этого пути способствовала поляризации макрофагов в направлении М2, приводя к косвенному ингибированию функции Т-клеток в ЦНС. Мы продемонстрировали, что форсколин вместе с IL-4 или форсколином вместе с IL-4 и IFNγ эффективно стимулировал фенотип М2 макрофагов, что указывает на высокую активность этого пути при перепрограммировании поляризации макрофагов в Th2- и даже в воспалительных состояниях, смешанных с Th1 / Th2, таких как как EAE. Механически, Форсколин и / или IL-4 активируют путь ERK в макрофагах, что приводит к усилению регуляции M2-ассоциированных молекул miR-124, аргиназы (Arg) 1 и рецептора маннозы C-типа 1 (Mrc1), которые были обращены ингибиторами ERK. Введение форсколина после начала ЭАЭ существенно положительно регулировало маркеры М2 Arg1, Mrc1, Fizz1 и Ym1 и ингибировало маркеры М1 синтетазы оксида азота 2 и CD86 в ЦНС во время ЭАЭ, приводя к снижению активации макрофагов / микроглии, лимфоцитов и CD4 Т-клеток. и выздоровление от болезни. Форсколин ингибировал пролиферацию и продукцию IFNγ CD4 T-клетками в ЦНС, но оказывал довольно слабое прямое влияние на пролиферацию аутоиммунных T-клеток на периферии и который был полностью изменен ингибиторами ERK. Введение форсколина после начала ЭАЭ существенно положительно регулировало маркеры М2 Arg1, Mrc1, Fizz1 и Ym1 и ингибировало маркеры М1 синтетазы оксида азота 2 и CD86 в ЦНС во время ЭАЭ, приводя к снижению активации макрофагов / микроглии, лимфоцитов и CD4 Т-клеток. и выздоровление от болезни. Форсколин ингибировал пролиферацию и продукцию IFNγ CD4 T-клетками в ЦНС, но оказывал довольно слабое прямое влияние на пролиферацию аутоиммунных T-клеток на периферии и который был полностью изменен ингибиторами ERK. Введение форсколина после начала ЭАЭ существенно положительно регулировало маркеры М2 Arg1, Mrc1, Fizz1 и Ym1 и ингибировало маркеры М1 синтетазы оксида азота 2 и CD86 в ЦНС во время ЭАЭ, приводя к снижению активации макрофагов / микроглии, лимфоцитов и CD4 Т-клеток. и выздоровление от болезни. Форсколин ингибировал пролиферацию и продукцию IFNγ CD4 T-клетками в ЦНС, но оказывал довольно слабое прямое влияние на пролиферацию аутоиммунных T-клеток на периферии и инфильтрация лимфоцитов и CD4 Т-клеток и выздоровление от болезни. Форсколин ингибировал пролиферацию и продукцию IFNγ CD4 T-клетками в ЦНС, но оказывал довольно слабое прямое влияние на пролиферацию аутоиммунных T-клеток на периферии и инфильтрация лимфоцитов и CD4 Т-клеток и выздоровление от болезни. Форсколин ингибировал пролиферацию и продукцию IFNγ CD4 T-клетками в ЦНС, но оказывал довольно слабое прямое влияние на пролиферацию аутоиммунных T-клеток на периферии иin vitro , что свидетельствует о распространенности косвенного влияния форсколина на дифференцировку и функции аутоиммунных CD4 T-клеток in vivo . Таким образом, наши данные указывают на то, что форсколин обладает способностью нарушать баланс в сторону М2, воздействуя на путь ERK в макрофагах, и косвенно ингибировать патогенные CD4 Т-клетки в ЦНС, что приводит к подавлению аутоиммунного воспаления. Эти данные могут также иметь значение для будущих терапевтических подходов к ингибированию аутоиммунных клеток Th1 в месте воспаления ткани.